Projeto: avaliação dos receptores de TNF-α na cardiopatia chagásica crônica

Abstract

RESUMO A doença de Chagas, causada pelo protozoário flagelado Trypanosoma cruzi é uma das mais importantes doenças infecto-parasitárias relacionadas à pobreza na América Latina, ressaltando a expansão da doença para países não endêmicos em virtude dos movimentos migratórios. A evolução clínica dos indivíduos não é previsível, onde 20-30% desenvolvem a forma cardíaca, 8-10% apresentam a forma digestiva, mas a maioria dos pacientes (cerca de 50-60%) permanecem na forma indeterminada (sem sinais e sintomas) Nesse sentido, investigações que elucidem o potencial evolutivo da doença de Chagas por meio do desenvolvimento de marcadores biológicos ou clínicos devem ser assumidas a fim de contribuir com novos estudos de condutas terapêuticas, melhorando a qualidade de vida dos doentes. As citocinas desempenham papel importante na regulação da resposta imune desta infecção e seguramente estão envolvidas na imunopatogênese da doença de Chagas. O TNF-α é um mediador importante de inflamação e consequentemente das respostas celulares frente aos microrganismos com múltiplas funções biológicas incluindo citotoxicidade às células tumorais e células infectadas por vírus, ações imunomodulatórias, atividade antiviral e início dos mecanismos de respostas inflamatórias. Estudos mostram que camundongos deficientes em TNFR1 e infectados pelo T. cruzi apresentam maior parasitemia e mortalidade cumulativa quando comparado aos animais do grupo controle, reafirmando o papel benéfico do TNF-α na infecção aguda. Por outro lado, esses animais também apresentam uma exacerbação do quadro inflamatório. Outro estudo demonstrou que os níveis de TNF-α e sTNFR2 estão elevados e associados à parasitemia em camundongos infectados, indicando que receptores estejam regulando a atividade da citocina. Apesar de avanços sobre os mecanismos de atuação e regulação dos receptores de TNF, pouco se conhece sobre o papel dessas moléculas na imunopatogênese doença e acreditamos que a expressão dos receptores de TNF- nas células da resposta imune, bem como a presença de formas solúveis desses receptores, possa ter papel relevante na manutenção dos mecanismos regulatórios exercidos pelos indivíduos portadores da forma indeterminada da doença de Chagas crônica. A partir disso, temos por objetivo, avaliar a expressão dos receptores de TNF- na cardiopatia chagásica crônica. Serão selecionados 60 portadores crônicos da doença de Chagas atendidos no Ambulatório de Doença de Chagas do Hospital Universitário Osvaldo Cruz (HUOC), da Universidade de Pernambuco (UPE) e 20 indivíduos não portadores da doença. . Avaliaremos no contexto ex vivo a frequência de receptores de TNF (TNFR1 e TNFR2) na superfície de linfócitos T CD4, CD8 e de monócitos CD14 por citômetria de fluxo. Além disso, quantificaremos os receptores solúveis de TNF (TNFR1 e TNFR2) e a citocina TNF-α em amostras de soro por Cytometric Bead Array (CBA). Os dados da expressão de mTNFR e sTNFR e da citocina TNF- serão correlacionados com os graus de gravidade da cardiopatia chagásica pelo percentual da fração de ejeção do ventrículo esquerdo (FEVE). Este estudo possui aprovação junto ao Comitê de Ética do CPqAM/Fiocruz-PE. Os experimentos serão realizados no Laboratório de Imunoparasitologia, Departamento de Imunologia do CPqAM. Este estudo faz parte de um subprojeto, coordenado pela pesquisadora Virginia Maria Barros de Lorena (CPqAM/Fiocruz) e possui financiamento do CNPq (DECIT/CNPq 40/2012 Pesquisa em Doenças negligenciadas - 403979/2012 9). Palavras-chave: Doença de Chagas; Trypanosoma cruzi; citocinas; TNF-α